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新产品发布 - STEMdiff 胃类器官试剂盒

时间:2021-09-30   浏览次数:393次


原创:STEMCELL


很高兴宣布推出从 hPSC 生成胃类器官的 。该培养系统由STEMdiff™ 胃类器官分化试剂盒和STEMdiff™ 胃类器官扩增试剂盒组成。其中STEMdiff™ 胃类器官分化试剂盒用于将 hPSC 分化为胃类器官,STEMdiff™ 胃类器官扩增试剂盒用于维持和扩增 hPSC 衍生的胃类器官。

 

产品描述

hPSC 衍生的胃类器官可用于研究胃发育、炎症、再生、微生物相互作用或疾病建模。 使用 STEMdiff™ 胃类器官分化试剂盒,可以高效且可重复地从hPSC 诱导和扩增胃类器官,以形成与发育中的胃具有生理相关性的便捷模型系统。

该试剂盒操作简单,包含四阶段操作步骤,参考了   发表的文献,能够直接从 hPSC 诱导并分化为胃类器官,并支持胃类器官的长期扩增和冷冻保存。用该试剂盒培养的胃类器官具有与发育中的胃上皮和相关间充质一致的细胞组成,为胃研究以及药物研发和化合物筛选提供了生理相关的模型系统。 该试剂盒优化用于mTeSR™1(#85850)或 mTeSR™ Plus(#100-0276)中培养的hPSC细胞。

 

 STEMdiff™ 胃类器官分化试剂盒


STEMdiff™ 胃类器官分化试剂盒

货号 #100-0475

1 Kit

STEMdiff™ Definitive Endoderm Basal Medium

05111

100 mL

STEMdiff™ Definitive Endoderm Supplement CJ (100x)

05113

1.1 mL

STEMdiff™ Gastrointestinal Supplement PK

05141

0.64 mL

STEMdiff™ Posterior Foregut Supplement

100-0477

0.64 mL

STEMdiff™ Gastric Organoid Medium

100-0478

100 mL

STEMdiff™ Gastric Organoid Expansion Supplement

100-0479

1.1 mL

 

STEMdiff™ 胃类器官扩增试剂盒

 

STEMdiff™ 胃类器官扩增试剂盒

货号 #100-0490

1 Kit

STEMdiff™ Gastric Organoid Medium

100-0478

100 mL

STEMdiff™ Gastric Organoid Expansion Supplement

100-0479

1.1 mL

STEMdiff™ 胃类器官分化试剂盒的示意图和分化过程中形态变化。

 hPSCs 以低密度(4,000 个细胞团块/孔)的形式接种在康宁® Matrigel® 包被的 24 孔板上的 mTeSR™1 中,过夜培养。每天更换 mTeSR™1 培养基维持 2-D 单层培养物,直到细胞聚合度达到接近85 - 90%。

(A) 在第 0 天,使用 STEMdiff™ Definitive Endoderm (DE) Medium(第 1 阶段)替换 mTeSR™1 培养基开始分化过程,每天更换培养基。 

(B) 在第 3 天,去除 STEMdiff™ Definitive Endoderm (DE) Medium并替换为 STEMdiff™ Gastric Posterior Foregut (PF) Medium(第 2 阶段)。在第 5 天,将retinoic acid (RA,视黄酸)添加到 PF 培养基中。 

(C) 在分化的第 7 天,从上清液中收集漂浮的后前肠球体并嵌入 Corning® Matrigel®。在第 7 天和第 10 天之间,在 STEMdiff™ Gastric Organoid Medium + RA 中培养嵌入的 PF 球体(第 3 阶段)。在第 10 天和第 26 天之间,球体在 STEMdiff™ Gastric Organoid Medium中成熟为被间充质包围的胃类器官。

(D) 在第 20 - 26 天,在 STEMdiff™ Gastric Organoid Medium中传代的胃类器官已进行完全分化,直到观察到胃标志物的表达(~第 34 天)。

(E)根据需求,可使用 STEMdiff™ Gastric Organoid Expansion Medium 扩增胃类器官用于下游应用或用CS10冷冻保存以备将来实验。


四阶段操作流程


应用方向

1.基础研究

2.胃的发育和功能

3.一般胃特异性细胞生物学

4.疾病建模

5.幽门螺杆菌感染

6.消化性溃疡病

7.胃炎

8.幽门狭窄

9.转化医学

10.精准医疗

11.胃毒性药物筛选



产品优势

▪ 成分:无血清培养基可最大程度地减少变异性。

▪ 操作简便:将 hPSC 分化为胃类器官只需简单的四阶段操作步骤。

▪ 生理相关性:产生模拟正在发育的胃和相关间充质的人胃类器官。

▪ 速度快:分化后的胃类器官可实现快速扩增及冻存。

 


相关产品推荐

胃类器官培养过程所需试剂和耗材: 

产品名称

货号

mTeSR™1 OR mTeSR™ Plus

85850 OR 100-0276

Corning® Matrigel® hESC-Qualified Matrix

Corning 354277

Corning® Matrigel® Growth Factor Reduced (GFR) Basement membrane Matrix, Phenol Red-Free (≥ 8 mg/mL protein)

Corning 356231

Gentle Cell Dissociation Reagent

07174

24-well tissue culture-treated flat-bottom plate

38017 or 38021

Anti-Adherence Rinsing Solution

07010

Retinoic acid(视黄酸,培养的第2-3阶段需要额外添加)

72262

DMEM/F-12 with 15 mM HPEPES

36254

Microcentrifuge tubes, 1.7 mL

38089

Cell scraper/lifter

38065 or 38067

D-PBS (Without Ca++ and Mg++)

37550

Conical tubes, 15 mL and 50 mL

38009 and 38010

CryoStor® CS10(用于胃类器官冻存)

07930

 


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